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  • 2022

    4-24
    細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)細(xì)胞污染類型及預(yù)防辦法

    凡混入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中對(duì)細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染,細(xì)胞污染不能*被消除,但能減少其發(fā)生的頻率和后果的嚴(yán)重性。本文將簡(jiǎn)要介紹幾種常見(jiàn)的細(xì)胞污染類型及處理方法。常見(jiàn)污染類型細(xì)菌污染特征:大小在0.5~5μm,比動(dòng)物細(xì)胞小很多。多呈球狀或桿狀,形態(tài)規(guī)則,分布均勻;增殖速度快,一般污染后48~72小時(shí)爆發(fā)式增殖;營(yíng)養(yǎng)消耗快,培養(yǎng)基很快變黃,變渾濁;鏡下觀察有明顯的定向運(yùn)動(dòng)。處理方法:輕度污染可用10X雙抗清洗處理,重度污染建議消殺后丟棄。真菌污染特征:呈鏈球狀...

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  • 2022

    4-22
    大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)和傳代流程

    體外培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞細(xì)胞周期有限;建議使用與procell配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基和正確的操作方法進(jìn)行培養(yǎng),以保證細(xì)胞處于理想培養(yǎng)狀態(tài)。procell實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞采用胰蛋白酶消化、神經(jīng)元特異性培養(yǎng)基培養(yǎng)、篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制制備。細(xì)胞總數(shù)約為5×105個(gè)細(xì)胞/瓶。大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)和傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作):1、從原培養(yǎng)瓶中吸出培養(yǎng)基,用PBS緩沖液潤(rùn)濕細(xì)胞兩次,加入2-3ml025%胰蛋白酶消化細(xì)胞(注意消化時(shí)間,一般控制在1-2min內(nèi));2...

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  • 2022

    4-21
    收到293 [HEK-293]細(xì)胞后如何操作?

    293[HEK-293]細(xì)胞是剪切過(guò)的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞,293[HEK-293]細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出,293[HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過(guò)對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293[HEK-293]細(xì)胞19號(hào)染色體(19q13.2)。293[HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主...

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  • 2022

    4-14
    直播答疑 | 普諾賽3月直播:細(xì)胞系由來(lái)及鑒定問(wèn)題

    在普諾賽3月30日開(kāi)播的細(xì)胞培養(yǎng)直播課堂中,有很多同學(xué)提出各種疑問(wèn)。我們篩選出具有代表性的問(wèn)題,并作了詳細(xì)解答。01動(dòng)物細(xì)胞怎么鑒定?要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的以及細(xì)胞類型進(jìn)行選擇。如果是人源細(xì)胞系,并且有文獻(xiàn)或數(shù)據(jù)庫(kù)公布對(duì)應(yīng)細(xì)胞信息,則進(jìn)行STR鑒定即可;如果使非人源的細(xì)胞系,可以進(jìn)行種屬鑒定,并且附加一個(gè)研究方向相關(guān)的指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證,部分小鼠細(xì)胞也可以做STR鑒定,但目前數(shù)據(jù)庫(kù)不*,很多都沒(méi)有匹配數(shù)據(jù)。對(duì)于原代細(xì)胞,如果能夠確保取材無(wú)誤,僅進(jìn)行特異性指標(biāo)方面的檢測(cè)就可以了,方法可采用...

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  • 2022

    4-12
    胎牛血清的儲(chǔ)存和使用都是有講究的

    胎牛血清是實(shí)驗(yàn)室常用的天然培養(yǎng)基,但不能直接使用。無(wú)論是存儲(chǔ)還是使用,都比較復(fù)雜。血清的常規(guī)處理是熱鈍化,即置于56°水浴中30分鐘;其目的是使血清中的補(bǔ)體成分和一些未知的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制分子失活。實(shí)驗(yàn)表明,大多數(shù)細(xì)胞不需要經(jīng)過(guò)正確處理后的熱滅活血清。經(jīng)過(guò)這樣的處理,血清只能輕微促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng),或者根本沒(méi)有作用。即使是高溫處理通常也會(huì)影響血清的質(zhì)量并降低細(xì)胞的生長(zhǎng)速度。熱處理過(guò)的血清會(huì)顯著增加沉淀物的形成。在倒置顯微鏡下觀察時(shí),這些沉淀物,如“小黑點(diǎn)”,常常使研究人員誤認(rèn)為血清被...

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  • 2022

    4-7
    雞卵泡顆粒細(xì)胞分離、培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)步驟

    雞卵泡顆粒細(xì)胞分離、培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)步驟:A.翅下靜脈注射2mLEDTA-2Na(W/V,2%)溶液處死母雞,新潔爾滅消毒液浸泡消毒5min,打開(kāi)腹腔,剪取整個(gè)卵巢,小心剝離卵泡(以8-15g為最佳),置于裝有PBS緩沖液的無(wú)菌培養(yǎng)皿中;B.用加有雙抗的PBS緩沖液沖去血污,漂洗3次;將漂洗干凈的卵泡移入裝有預(yù)冷PBS緩沖液的平皿中,剝凈卵泡外膜、結(jié)締組織及血管網(wǎng);C.用手術(shù)刀在卵泡表面劃一道1-2cm長(zhǎng)的切口(動(dòng)作要快),釋放卵黃,用PBS緩沖液將剩余的卵黃液漂洗干凈,剩下的卵泡膜...

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  • 2022

    4-6
    大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離方法主要有這兩種

    大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是在哺乳動(dòng)物骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞亞群,具有多種分化潛能,可分化成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)和成肌細(xì)胞。它們不僅機(jī)械地支持骨髓中的造血干細(xì)胞(HSC),而且還分泌多種生長(zhǎng)因子(如IL-6、IL-11、LIF、M-CSF和SCF)來(lái)支持造血。常用的MSC分離方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法。全骨髓法是根據(jù)干細(xì)胞在低血清培養(yǎng)基中的優(yōu)勢(shì)特性,定期更換溶液去除非貼壁細(xì)胞,從而達(dá)到純化和擴(kuò)增MSC的目的。密度梯度離心是根據(jù)骨髓中各細(xì)胞成分的不同比例,分離出單核細(xì)胞進(jìn)行貼壁...

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  • 2022

    3-31
    3月高分文獻(xiàn)精選:普諾賽助力各類疾病研究

    截止至2022年3月,使用普諾賽產(chǎn)品發(fā)表的文獻(xiàn),總發(fā)表篇數(shù)達(dá)3000+,單篇最高影響因子達(dá)39.849。本期我們精選5篇影響因子在15分以上的文獻(xiàn),進(jìn)行分享。其中,使用普諾賽產(chǎn)品MC3T3-E1細(xì)胞和HOS細(xì)胞發(fā)表于知-名期刊MaterialsToday的文章,單篇影響因子高達(dá)31.041。正是因?yàn)樵絹?lái)越多研究團(tuán)隊(duì)的選擇,我們對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量從未松懈,期待為您帶來(lái)更好的體驗(yàn)!高分文獻(xiàn)精選01用于骨肉瘤臨床治療和組織再生的新型光熱控制多功能支架Anovelphotothermally...

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