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2024
3-15在養(yǎng)細胞的過程中，實驗室污染仍是普遍存在的問題。在這個過程中，使用的試劑、耗材、環(huán)境、操作等都有可能造成污染，如支原體污染、細菌污染等[1]。污染會影響細胞的生長和形態(tài)，甚至導致細胞功能、性質(zhì)發(fā)生改變，進而影響實驗研究的準確性。因此，對實驗室污染進行預防、排查與清除，是至關(guān)重要的。本期細胞學堂為您整理了一份實驗室污染最-全應(yīng)對攻略，幫助您快速上手清除污染。01污染的預防嚴格執(zhí)行細胞實驗室規(guī)章制度不斷完善無菌實驗室規(guī)章制度，加強無菌實驗室的管理。外來進修人員、實習學生進入實驗室...
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2-19骨髓間充質(zhì)干細胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs）來源于中胚層，是具有多分化潛能的細胞。細胞生物學表明，BMSCs具有較強的增殖能力和多向分化潛能。在不同誘導條件下，可向中胚層細胞如脂肪細胞、成骨細胞、肌細胞等分化。BMSCs是理想的種子細胞來源之一，在細胞替代治療、基因治療及組織器官再造中具有重要的臨床應(yīng)用價值。本期細胞學堂為大家整理了大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分離提取的方法、注意事項及鑒定指標，幫助您快速上手開展實驗。分離提取步驟骨髓取...
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1-29提起細胞培養(yǎng)，相信很多老師都遇到過培養(yǎng)液中的“小黑點”，因無法確定它的身份而頭痛不已。本期細胞學堂將為大家揭秘這些黑點究竟是什么，幫助您快速上手開展實驗。01血清沉淀血清在融解過程中會產(chǎn)生大量的析出物，呈現(xiàn)出小顆粒樣的東西，甚至呈纖維樣，這是由于血清融解后導致的蛋白、鹽類物質(zhì)的析出。血清融解時混勻血清靜置融解不混勻，出現(xiàn)黑點顯微鏡下的血清沉淀物影響因素通常血清析出物的多少與融解方法有關(guān)。通過4℃冰箱解凍和溶解過程持續(xù)搖晃混勻，可以有效避免沉淀產(chǎn)生，而37℃靜置混勻則會有較多沉...
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1-25BV2細胞系由E·Blasi于1990年建立，應(yīng)用小鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細胞經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄病毒介導轉(zhuǎn)染v-raf/v-myc獲得永生化，在模擬神經(jīng)系統(tǒng)疾病和研究相關(guān)疾病機制方面應(yīng)用廣泛。BV2細胞保留有小神經(jīng)膠質(zhì)細胞多種形態(tài)、表征和功能特征，免疫組化結(jié)果顯示，BV2細胞為MAC1、MAC2陽性，MAC3、膠質(zhì)細胞原纖維酸性蛋白、半乳糖腦苷脂陰性。培養(yǎng)BV2細胞時，最常遇到的問題就是細胞形態(tài)異常，通常伴隨著細胞形狀改變、拉絲較多等，對大家的實驗造成影響。本期細胞學堂為大家整理了BV2細胞的培...
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1-24細胞凋亡的幾種檢測方法：一形態(tài)學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細胞呈圓形，胞核深染，胞質(zhì)濃縮，染色質(zhì)成團塊狀，細胞表面有“出芽”現(xiàn)象。2、丫啶橙（AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核呈黃綠色熒光，胞質(zhì)呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質(zhì)呈黃綠色濃聚在核膜內(nèi)側(cè)，可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色：如果細胞膜不完整、破裂，臺盼藍染料進入細胞，細胞變藍，即為壞死。如果細胞膜完整，細胞不為臺盼藍染色，則為正常細胞或凋亡細胞。此方法對反映細胞膜的完整性，區(qū)別壞死細胞有一定的幫...
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1-16細胞培養(yǎng)過程中，我們通常會遇到各種各樣的問題，這些問題一般是多種因素造成的，如細胞密度、培養(yǎng)環(huán)境、操作方法等。2023年，普諾賽圍繞細胞培養(yǎng)問題，共舉辦了10場線上直播，吸引了萬余人觀看。直播期間，大家踴躍發(fā)言，提出了日常實驗中遇到的問題。本期直播答疑篩選出部分問題做了詳細解答。牙源性干細胞培養(yǎng)時，血清會誘導分化嗎？血清成份復雜，里面包含抑制分化的因子，也包含促進分化的因子；間充質(zhì)干細胞一類成體干細胞大多可以用血清培養(yǎng)，單能干細胞，用血清不會分化；胚胎干會細胞分化。血清的刺激...
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12-2812月14日的直播中，普諾賽直播間為大家介紹了細胞黑點、細胞狀態(tài)變形、細胞空泡、聚團、脫落等常見問題，直播回放請至B站-“普諾賽生物”進行觀看。本期直播答疑，從直播間提問中，篩選出部分有代表性的問題，做了詳細解答。如有其他問題，也歡迎大家在公眾號留言，我們將在線解答。消化時間過長會損傷細胞嗎？消化時間過長會導致細胞膜蛋白的改變，最直觀的表現(xiàn)就是消化后第二天漂浮細胞很多或者貼壁慢。胰酶消化不掉的，二次消化對細胞損傷小還是機械吹打?qū)毎麚p傷??？建議二次消化。細胞與細胞間的連接沒有...
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12-26A-498（人腎癌細胞）細胞由Aaronson·S建立，是從一名52歲女性腎癌患者的腎組織中分離出的具有上皮形態(tài)的細胞系。該細胞系是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主，在腫瘤研究中具有一定的應(yīng)用價值，常作為腎細胞癌研究的模型。本期細胞學堂為大家整理了A-498細胞的培養(yǎng)條件與傳代、凍存步驟及常見應(yīng)用，幫助您快速上手開展實驗。細胞形態(tài)A498細胞貼壁生長，呈上皮樣形態(tài)，細胞鋪開面積大，單位面積細胞總數(shù)量少，少量細胞有觸角；低密度時可觀察到單個細胞清晰的邊緣，密度大于100%時邊緣不清晰，細胞與...
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