三、稀釋方法

1. 體積比稀釋
   • 示例：將10 mL標(biāo)準(zhǔn)PBS加入90 mL去離子水，得到1:10稀釋液。
   • 工具：使用移液器或量筒精確量取，避免污染。
2. 質(zhì)量體積比稀釋
   • 適用場景：需精確控制NaCl濃度時（如配制0.01 M磷酸鹽 + 0.014 M NaCl）。
   • 計算：根據(jù)目標(biāo)濃度計算所需NaCl質(zhì)量（如0.014 M × 58.44 g/mol × 1 L = 0.818 g NaCl/L）。
3. 分步稀釋
   • 步驟：先稀釋磷酸鹽濃度，再調(diào)整NaCl濃度（如需同時降低兩者）。

四、稀釋后驗證

1. pH測量
   • 稀釋可能改變pH，需用pH計重新測定并調(diào)節(jié)至目標(biāo)值（如7.4）。
   • 調(diào)整方法：滴加濃鹽酸（降低pH）或氫氧化鈉（升高pH）。
2. 滲透壓檢測
   • 使用滲透壓計驗證稀釋液是否符合實驗要求（如細(xì)胞培養(yǎng)需280-320 mOsm/kg）。
3. 無菌性檢查
   • 若稀釋后用于細(xì)胞實驗，需通過濾膜過濾（0.22 μm）或高壓滅菌確保無菌。

五、注意事項

1. 避免反復(fù)凍融
   • 稀釋后的PBS應(yīng)分裝保存，避免反復(fù)解凍導(dǎo)致pH或滲透壓變化。
2. 兼容性測試
   • *次使用稀釋液時，需進行預(yù)實驗驗證其對細(xì)胞活性或?qū)嶒灲Y(jié)果的影響（如MTT實驗檢測細(xì)胞毒性）。
3. 標(biāo)記與記錄
   • 稀釋液需明確標(biāo)注濃度、pH、配制日期及滅菌狀態(tài)，避免混淆。
4. 特殊實驗需求
   • 透皮吸收實驗：可能需稀釋至與接收液成分一致（如含4% BSA的PBS）。
   • 蛋白質(zhì)電泳：需使用無NaCl的磷酸鹽緩沖液（如Tris-Glycine系統(tǒng)）。